細胞破碎技術
動物、植物及微生物長成的天然產物有胞外型和胞內型兩種。為回收胞內產物,需要利用外力破壞細胞膜和細胞壁,使細胞內含物釋放出來,然后再進行分離純化。細胞破碎就是采用物理、化學、酶或機械的方法,利用外力在一定程度上破壞細胞壁和細胞膜,使細胞內容物包括目的產物成分釋放到液相中。細胞破碎分離提純某一種蛋白質時,首先要把蛋白質從組織或細胞中釋放出來并保持原來的天然狀態,不喪失活性。所以要采用適當的方法將組織和細胞破碎。不同的生物體或同一生物體的不同部位的組織,其細胞破碎的難易不一,使用的方法也不相同,如動物臟器的細胞膜較脆弱,容易破碎,植物和微生物由于具有較堅固的纖維素、半纖維素組成的細胞壁。因此,細胞破碎的目的是釋放出細胞內含物。細胞破碎技術是提取胞內產物的關鍵性步驟,是分離純化細胞內合成的非分泌型生化物質(產品)的基礎。生物分離技術在細胞碎片的去除,細胞胞內物質、蛋白質、天然生物物質的提取分離方面有獨特的優勢,在生物工業上具有廣闊的應用前景。菌體細胞破碎技術的進展為工業化分離菌體細胞和大規模生產胞內物質創造了技術前提。結合重組DNA技術和組織培養技術上的重大進展,蛋白質可以大規模生產。細胞破碎率的高低決定著胞內產物釋放率的高低,也決定著產品的收率和成本。細胞破碎率越高,胞內產物釋放的越多;細胞破碎率越低,胞內產物釋放的越少。因此,安全有效地提取胞內產物,提高細胞破碎率,很大程度上提高了產品的產量。
細胞破碎就是采用物理、化學、酶或機械的方法,在一定程度上破壞細胞壁和細胞膜,設法使胞內產物最大程度地釋放到液相中,細胞破碎是提取胞內產物的關鍵性步驟。細胞破碎技術是分離純化細胞內合成的非分泌型生化物質(產品)的基礎。
細胞破碎方式可規納為機械法和非機械法兩大類。細胞破壁的方法很多,按照是否存在外加作用力,可分為機械法和非機械法。按照物理和非物理方法可分為物理法和化學法。物理方法主要有:根據破壁溫度可分為低溫物理破壁,超低溫物理破壁;根據用力情況可分為高速撞擊破壁,剪切力破壁等,非物理方法主要有化學試劑法及生物酶解法。
高壓細胞破碎儀具有破碎組織、細菌、病毒、孢子及其它細胞結構,勻質、乳化、混合、脫氣、崩解和分散、浸出和提取,加速反應等功能,故廣泛應用于生物、醫學、化學、制藥、食品、化妝品、環保等實驗室研究及企業生產。采用高壓細胞破碎法,處理量大、破碎速度較快。此過程中只發生物質狀態的變化,而無化學反應變化;是物質量的分配,而不是質的飛躍。
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