產品名稱:PhD生產型高壓細胞破碎儀
產品型號:D-100M
產品品牌:PhD
產品產地:美國
英文名稱:PhD High Pressure Homogenizer
產品應用:乳液、分散體、細胞破壁、脂質體
產品原理
由電源(110V/220V/380V, 60/50 Hz) 驅動PhD高壓均質機的一個或者多個泵柱塞做往復運動,物料在柱塞作用下進入可調節壓力大小的閥組中經過特定寬度的限流縫隙均質區,瞬間失壓的物料以極高的流速(1000-1500米/秒)噴出,在均質閥內產生三種效應:空穴效應、撞擊效應、剪切效應。經過這三種效應相互作用處理過后,物料粒徑可均勻細化到100nm以下,細胞破碎率大于97%。
產品參數
產品優勢
應用背景
腸埃希氏菌(E. coli)通常稱為大腸桿菌,是Escherich在1885年發現的,在相當長的一段時間內,一直被當作正常腸道菌群的組成部分,認為是非致病菌。直到20世紀中葉,才認識到一些特殊血清型的大腸桿菌對人和動物有病原性,尤其對嬰兒和幼畜(禽),常引起嚴重腹瀉和敗血癥,它是一種普通的原核生物,大腸桿菌屬于細菌。
應用優勢
大腸桿菌作為外源基因表達的宿主,遺傳背景清楚,技術操作簡單,培養條件簡單,大規模發酵經濟,倍受遺傳工程專家的重視。目前大腸桿菌是應用最廣泛,最成功的表達體系,常做高效表達的首選體系。大腸桿菌更適合原核基因的表達,外源基因表達產量與單位體積產量是正相相關的,而單位體積產量與細胞濃度和每個細胞平均表達產量呈正相相關。細胞濃度與生長速率,外源基因拷貝數和表達產物產量之間存在動態平衡,單個細胞的產量又與外源基因拷貝數,基因表達效率,表達產物的穩定性和細胞代謝負荷等因素有關。
應用案例
例如科學家們把人的胰島素基因送到大腸桿菌的細胞里,基因重組E.coli細胞表達純化,讓胰島素基因和大腸桿菌的遺傳物質相結合。人的胰島素基因在大腸桿菌的細胞里指揮著大腸桿菌生產出了人的胰島素。并隨著它的繁殖,胰島素基因也一代代的傳了下去,后代的大腸桿菌也能生產胰島素了。這種帶上了人工給予的新的遺傳性狀的細菌,被稱為基因工程菌。
應用方案
通過高壓細胞破碎儀使物料在柱塞作用下進入可調節壓力大小的閥組中經過特定寬度的限流縫隙均質區在均質閥內產生三種效應:空穴效應、撞擊效應、剪切效應的機械作用力從而打破細胞壁的束縛,把蛋白質從組織或細胞中釋放出來盡可能保持原來的天然狀態,不喪失活性,達到高效率破碎細胞的效果。即使用高壓勻漿破碎法采用高壓細胞破碎法,在細胞內產生的壓力效應,從而能夠有效地提取出蛋白質,且處理量大、破碎速度較快。這是一種機械處理細胞,物理抽提方法。
解決方案
首先富集菌體,收集胞內產物的細胞或菌體。然后進行細胞重懸,用適當的緩沖液或培養液將離心或沉降等方法得到的固體(沉淀、細胞、活性物質等等)重新懸浮。其次進行細胞破碎,使產物轉移到液相中。最后收集含生化物質的液相,進行碎片分離,分離除去細胞、菌體、細胞碎片、蛋白質的沉淀物和絮凝體等固體懸浮物,得到上清液或濾液。然后從澄清的濾液中提取胞內產物,從細胞裂解物中獲取目標產物。
PhD優勢
原核表達系統是基因表達技術中發展最早,應用最廣泛的蛋白表達系統之一。近幾十年,大腸桿菌表達系統也不斷得到發展和完善,被科研及工業用戶大量用于各種重組蛋白表達。市面上的重組蛋白有30%是由大腸桿菌表達系統生產而來,是小分子細胞質蛋白或結構域表達的首選宿主。在大腸桿菌表達系統中表達的外源基因包括原核基因和真核基因;原核基因可以直接在大腸桿菌中表達出來,真核基因含有內含子,大腸桿菌不能對mRNA進行剪切形成成熟的mRNA,因此,真核基因一般以cDNA構建表達載體在大腸桿菌系統中表達。
◆破壁能力:高壓設計,輕松上壓;均質效率高,工藝穩定;穩定的破碎能力,更高的胞內物提取;純機械破碎,無化學污染;可放大工業化生產工藝設備
◆控溫效果:獨特溫控設計,內置和外置雙向控溫,確保均質過程及出料溫度可控。
◆活性保障:循環的控溫系統,蛋白活性不失活,細胞破碎后,活性保值高達99%
◆無菌保障:金屬結構連接,沒有O型圈或墊片,無死角設計;在線排空結構設計;所有機型均可實現在線清洗(CIP)、循環清洗、拆裝清洗、在位滅菌(SIP)
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